微(wei)生(sheng)物(wu)限(xian)度測(ce)定儀操(cao)作(zuo)流(liu)程(cheng)詳細(xi)介紹:
1.前(qian)期(qi)準備(bei)
設備(bei)檢(jian)查(zha):使用(yong)前(qian)需(xu)仔(zai)細(xi)查(zha)看抽(chou)濾管(guan)路(lu)是否(fou)破(po)損(sun)、漏氣(qi),各(ge)部件連接(jie)是否(fou)穩固;確(que)認真(zhen)空泵(beng)運(yun)行(xing)正(zheng)常,控(kong)制(zhi)系統(tong)顯示與操作(zuo)功(gong)能完(wan)好(hao);同(tong)時(shi)確(que)保設備(bei)接(jie)地(di)良好(hao)以保障用電(dian)安全。
環境(jing)要(yao)求:儀(yi)器(qi)應(ying)放置在(zai)潔凈(jing)、無(wu)塵、溫濕度適(shi)宜的(de)實驗室中(zhong),理(li)想(xiang)溫度範圍為18℃–26℃,相(xiang)對(dui)濕度保持(chi)在45%–65%。檢(jian)測過程(cheng)需(xu)在(zai)無(wu)菌操(cao)作(zuo)臺(tai)內(nei)進(jin)行(xing),提前(qian)開啟紫外(wai)燈(deng)滅(mie)菌30分鐘(zhong)以上,隨後運行風(feng)機(ji)凈(jing)化空氣(qi)。
耗材(cai)與(yu)試劑準(zhun)備(bei):準(zhun)備(bei)好(hao)經過嚴(yan)格(ge)滅(mie)菌處(chu)理的(de)無(wu)菌濾膜、過濾杯(bei)、集(ji)菌(jun)培(pei)養器等耗材(cai),以及稀(xi)釋(shi)劑、沖洗(xi)液(ye)和(he)培養基等(deng)試劑。所(suo)有(you)物(wu)品(pin)均(jun)需(xu)在(zai)有(you)效(xiao)期(qi)內(nei)使用(yong),並(bing)確(que)保其無(wu)菌狀態。
2.儀器預(yu)熱與參(can)數設置:接(jie)通電源並(bing)打(da)開設備(bei)開關(guan),預(yu)熱5–10分鐘(zhong)。根(gen)據(ju)檢測標(biao)準和(he)供試品特性,在(zai)控制(zhi)系統(tong)上設置合適的(de)抽(chou)濾時(shi)間(jian)與壓力(li),壹般(ban)抽(chou)濾壓力(li)控(kong)制(zhi)在-0.08MPa至(zhi)-0.02MPa之(zhi)間(jian),抽(chou)濾時(shi)間(jian)則(ze)依(yi)據(ju)溶(rong)液(ye)體積而定(ding)。
3.樣(yang)品處(chu)理與過濾:在無(wu)菌操(cao)作(zuo)臺(tai)中(zhong),將供試品按(an)規定(ding)方(fang)法稀(xi)釋(shi)制(zhi)備(bei)成溶液,倒入(ru)安裝於(yu)儀(yi)器上的(de)過濾杯(bei)內(nei),迅速覆(fu)蓋無(wu)菌濾膜並(bing)旋(xuan)緊(jin)杯(bei)蓋(gai)。啟動抽(chou)濾系統(tong),使溶(rong)液通(tong)過濾膜,若樣品(pin)存(cun)在(zai)抑(yi)菌成分,需(xu)用(yong)適量沖洗(xi)液(ye)沖洗(xi)濾膜以消除(chu)抑(yi)菌作(zuo)用(yong)。
4.濾膜轉(zhuan)移(yi)與培養(yang):抽(chou)濾完(wan)成後,關(guan)閉(bi)系統(tong),在無(wu)菌條(tiao)件下用鑷子(zi)將截(jie)留微生(sheng)物(wu)的(de)濾膜轉(zhuan)移(yi)至含有(you)對(dui)應(ying)培養(yang)基的(de)集菌(jun)培(pei)養(yang)器中(zhong),保證(zheng)濾膜與(yu)培(pei)養基充(chong)分接(jie)觸。然(ran)後將培(pei)養器放(fang)入(ru)恒(heng)溫培養(yang)箱,按照微生(sheng)物(wu)種(zhong)類(lei)設定(ding)培養(yang)溫度和(he)時(shi)間(jian),如細(xi)菌通常在(zai)30℃–35℃下培養(yang)3–5天(tian),黴(mei)菌(jun)和(he)酵母(mu)菌(jun)則(ze)在(zai)23℃–28℃下培養(yang)5–7天(tian)。
5.結果觀(guan)察與(yu)分析:培(pei)養(yang)結束後,對(dui)培(pei)養基上的(de)菌落(luo)進(jin)行(xing)計數和(he)鑒(jian)定,依(yi)據(ju)相(xiang)關(guan)標(biao)準判(pan)斷供試品是(shi)否(fou)符(fu)合微生(sheng)物(wu)限(xian)度要(yao)求。若結果異常,需(xu)復(fu)查(zha)檢測(ce)過程(cheng)。
1.抽(chou)濾速度過慢:可能是濾膜堵(du)塞(sai)、管(guan)路(lu)不(bu)暢(chang)或(huo)真空泵(beng)負壓不(bu)足所致(zhi)。此(ci)時(shi)可(ke)更(geng)換(huan)濾膜,檢(jian)查(zha)並(bing)清(qing)理抽(chou)濾管(guan)路(lu),或者(zhe)對(dui)真(zhen)空泵(beng)進(jin)行(xing)維(wei)護保養、更(geng)換(huan)真(zhen)空泵(beng)油(you)。
2.菌落(luo)計數異常:原(yuan)因(yin)可能包(bao)括(kuo)樣(yang)品汙染(ran)、操(cao)作(zuo)不(bu)規範、培(pei)養(yang)基問(wen)題等。需(xu)要(yao)重(zhong)新檢查(zha)樣品(pin)制(zhi)備(bei)過程(cheng),嚴(yan)格遵守無(wu)菌操(cao)作(zuo)規(gui)範,檢(jian)查(zha)培養(yang)基的(de)配制(zhi)與滅(mie)菌情況,必要(yao)時(shi)更(geng)換(huan)培(pei)養基(ji)。
3.設備(bei)運(yun)行故障(zhang):如出(chu)現異常噪(zao)音(yin)、控(kong)制(zhi)系統(tong)失靈等問(wen)題,應(ying)立(li)即停止使用(yong)設備(bei),聯(lian)系專業維(wei)修人(ren)員(yuan)進(jin)行(xing)檢修,切勿(wu)自(zi)行(xing)拆卸(xie)設備(bei)。
